Výuka a studijní materiály
Technika explantátových kultur
(PŘ, CV)
Přednášející: B. Navrátilová
Vedoucí cvičení: B. Navrátilová, D. Skálová
Rozsah kurzu: 1/1 (bude dle možností blokováno)
Forma ověřování výsledků: kolokvium
Počet kreditních bodů: 3
Stručná anotace předmětu:
Předmět navazuje na přednášky z fyziologie rostlin. Zabývá se historií a základními principy explantátových kultur rostlin (EKR), zásadami práce, regeneračními schopnostmi rostlin, somatickou variabilitou a jejím využitím, morfogenezí (organogeneze, embryogeneze), základními metodami (meristémové, kalusové, prašníkové a protoplastové kultury, fúze protoplastů, embryokultury, somatická embryogeneze), využitím EKR v praxi a jejich perspektivami.
Sylabus přednášek (blokováno 1 x za 2 týdny)
- Explantátové kultury rostlin (EKR) - explantát, totipotence rostlinné buňky, historie EKR
- Metody EKR - kultivační podmínky, práce s EKR, kultivační média, fytohormony a látky
s růstově regulačním působením (rozdělení, účinnost)
- Regenerace rostlin in vivo a in vitro (přímá, nepřímá), symptomy in vitro
- Meristémové kultury - využití v praxi (ozdravování, množení)
- Embryokultury in vivo a in vitro, využití embryokultur
- Kalus - kalusové kultury; somaklonální variabilita, využití
- Suspenzní kultury, somatická embryogeneze, umělá semena
- Sekundární metabolity - indukovaná produkce metabolitů in vitro
- Gametická embryogeneze - androgeneze, ontogeneze pylu in vivo a in vitro, gynogeneze,
využití haploidů v praxi
- Protoplastové kultury a fúze protoplastů (typy a využití), cybridizace
- Transgenní rostliny, historie a současnost (perspektivy)
- Fytopatologie in vitro
- Toxikologie in vitro
- Uchovávání genofondu in vitro, genobanky
Praktická cvičení (blokována):
- Bezpečnost práce v laboratoři, prohlídka laboratoří, příprava kultivačních médií a roztoků,
sterilizace nástrojů a skla, příprava rostlinného materiálu pro aseptickou práci.
- Mikropropagace rostlin - vliv růstových regulátorů v médiu na zmnožení rostlin.
(rod Dianthus, Dionea, Drosera, Fragaria, Solanum,...) hodnocení zmnožení po 4
týdnech.
Převod in vitro rostoucích rostlin do nesterilních podmínek (perlit, jiffy).
Příprava médií pro embryokultury a prašníkové kultury.
- Embryokultury - izolace a dopěstování nezralých embryí u Capsicum annuum.
Založení meristémových kultur Brassica oleracea var. botrytis.
- Založení prašníkové kultury (dle dostupného rostlinného materiálu Petunia sp., Brassica
oleracea, Nicotina sp.), před kolokviem vyhodnocení.
Příprava rostlinného materiálu (výsevy) a roztoků pro protoplastové kultury.
- Izolace a fúze protoplastů (in vitro rostliny rodů Cucumis sp. nebo Lycopersicon sp.,
enzymatická příprava, hustota a životnost izolovaných protoplastů, fúze pomocí PEG).
- Vlastní vyhodnocení založených experimentů a dokumentace.
(Možná vlastní fotodokumentace v průběhu všech cvičení.)
Prezentace
Níže uvedené odkazy reprezentují presentaci, používanou jako podpůrná osnova při přednáškách a návody na cvičení. Chcete-li si presentaci tisknout, preferujte příslušný PDF soubor.
Všechna práva autorky a reprodukovaných děl vyhrazena. (C) Navrátilová B., 2004-2010
Literatura:
Callaway D. J., Callaway M. B.: Breeding Ornamental Plants. Timber press, Oregon, 2000
Lindsey K.: Plant Tissue Culture. Manual. Kluwer Academic Publishers, London, 1992
Kováč J.: Explantátové kultury rostlin. UP, Olomouc, 1995
Procházka S. a kolektiv: Fyziologie rostlin. Praha, Academia, 1998
Smith R.H.: Plant Tissue Culture. Techniques and Experiments. Second Edition. Academic Press, 2000
Votruba J.: Explantátové techniky (pro biotechnology a šlechtitele), VŠZ, Praha, 1987
Seznam výuky zajišťované katedrou botaniky